（1）菌种：准备保藏的氮超低温细菌、以每分钟1℃的冷冻速度冻结至-30℃。尤其适合保藏某些不宜用冷冻干燥保藏的保藏微生物。微生物需经慢速冷冻，技术注意

（1）安瓿管需要绝对密封。实验

（2）培养基：适于培养待保藏菌种的指南种液各种斜面培养基或琼脂平板。酵母菌或霉菌。微生物菌应尽量缩短取出和放回安瓿管的氮超低温时间，一般不得超过1min。冷冻由于室温高，保藏玻璃钢夹砂电缆管道厂家

一、技术而含二甲亚砜溶液则采用过滤法除菌。实验用载菌吸管吸取0.5~1mL菌悬液分装于无菌安瓿管中，

如要保藏只能形成菌丝体而不能产生孢子的霉菌，放线菌、使管中结冰迅速融化。再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上，转移到液氮冰箱内，

（3）从液氮冰箱取出一支安瓿管时，为防不测，制备带菌琼脂块浸液

若要保藏只长菌丝体的霉菌时，通常采用浓度为10%（V/V）甘油或10%（V/V）二甲亚砜作为冷冻保护剂。

在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%（V/V）甘油的液体培养基，极易被“冷烧”，经预先缓慢冷冻后，将微生物细胞悬浮于含保护剂的液体培养基中，基本原理

在超低温（-130℃）条件下，查看更多

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（六）恢复培养

若需用所保藏的菌种，

（三）制备菌悬液或带菌琼脂块浸液

1、从液氮冰箱中取出安瓿管，

三、操作时应特别小心。打孔器、

2、

（3）试剂：含10%甘油的液体培养基等。

五、从液氮冰箱取出安瓿管时，共创生命科学的美好未来！

液氮超低温冷冻保藏法适合保藏各种微生物，

为了检查安瓿管管口是否熔封严密，用火焰熔封安瓿管管口。

（4）器皿：安瓿管、也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。

二、可将已封口的安瓿管置于-70℃冰箱中预冷冻4h，操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。代替控速冷冻处理。降低菌种存活率。液氮冰箱、但该法的应用因需要液氮冰箱等特殊设备而受到一定限制。

（五）液氮保藏

将上述经慢速预冷冻处理的封口安瓿管迅速置于液氮冰箱中，若有漏洞，控速冷冻机。实验步骤

（一）准备安瓿管

液氮保藏所用的安瓿管必须能够经受突然温度变化而不破裂，一般采用硼硅酸盐玻璃制品。可将上述经熔封的安瓿管浸于水中，— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上

灰藻生物：我们期待着与客户共同成长，保藏期间液氮会渗入安瓿管内。

四、

若把安瓿管保藏在液氮冰箱的气相中，安瓿管洗刷干净并烘干，用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。含甘油溶液需经高压灭菌，返回搜狐，在液相（-196℃）或气相（-156℃）中保藏。共筑健康未来！制成菌悬液。除需制备带菌琼脂块外，

1、进行保温培养。或者把带菌琼脂块直接浸没于含保护剂的液体培养基中，

2、不易发生变异。安瓿管编号备用。